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人乳腺癌細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記

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產(chǎn)品名稱(chēng): 人乳腺癌細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記
產(chǎn)品型號(hào): MDA-MB-231-luc
產(chǎn)品廠(chǎng)商: 美國(guó)ATCC
產(chǎn)品文檔: 無(wú)相關(guān)文檔


簡(jiǎn)單介紹

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人乳腺癌細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記 的詳細(xì)介紹

          MDA-MB-231-luc人乳腺癌細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記

 

1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加4-6mL完全培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),培養(yǎng)過(guò)夜。**天換液并檢查細(xì)胞密度。

2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

 

1、對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的完全培養(yǎng)基終止消化。

3.輕輕吹打細(xì)胞,完全脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,將細(xì)胞懸液按1215的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。



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