鴨禽流感病毒抗體檢測試劑盒
【主要組成成份】
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序號
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名稱
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規(guī)格（48T/96T）
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序號
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名稱
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規(guī)格（48T/96T）（48T/96T）（48T/96T）（48T/96T）（48T/96T）（48T/96T）
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1
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包被板
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12孔×4/8條
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7
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終止液（6號液）
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6ml×1瓶
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2
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酶結(jié)合物（1號液）
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3/6ml×1瓶
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8
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陽性對照品
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0.8ml×1支
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3
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濃縮洗滌液（2號液）
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25/50ml×1瓶
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9
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陰性對照品
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0.8ml×1支
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4
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底物（3號液）
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6ml×1瓶
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10
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不干膠膜
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1/2片
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5
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顯色劑（4號液）
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6ml×1瓶
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11
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自封袋
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1個
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6
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樣本稀釋液（5號液）
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25/50ml×1瓶
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12
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說明書
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1份
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【儲存條件及有效期】
1. 2~8℃避光保存，防止冷凍，有效期為12個月。
2. 包被板開封后2~8℃避光保存，使用期限為15天。
【適用儀器】
含450nm和630nm波長酶標(biāo)儀；37℃恒溫設(shè)備；可調(diào)微量移液器。
【樣本要求】
1. 為取得*佳實(shí)驗效果，避免使用含疊氮鈉、高血脂、長菌以及嚴(yán)重溶血的樣品；
2. 短期（7天）將進(jìn)行檢測的血清樣品可存放于2～8℃；如需長期保存，應(yīng)置于-20℃或以下，避免反復(fù)凍融。
【檢驗方法】
1. 洗滌液配制：用蒸餾水或去離子水將濃縮洗滌液（2號液）按1：10稀釋（如取50ml濃縮液與450ml蒸餾水或去離子水），充分混勻即為工作洗滌液。
2. 樣本稀釋：用樣本稀釋液（5號液）將待檢血清按1:100稀釋（如5μl血清＋495μl樣本稀釋液），充分混勻。 陰性、陽性對照品不用稀釋，直接加樣。
3. 加樣反應(yīng)：每次試驗設(shè)陰性對照2孔、陽性及空白對照各1孔（分別加入陰性、陽性對照及樣本稀釋液100μl）。樣本檢測孔每孔加已稀釋血清樣本100μl。37℃避光反應(yīng)30分鐘。甩去孔內(nèi)液體，每孔注滿工作濃度洗滌液洗滌3次，每次均需停留1分鐘；*后一次甩凈，拍干。
4. 加酶反應(yīng)：除空白對照孔外，其余每孔加酶結(jié)合物（1號液）1滴，37℃避光反應(yīng)30分鐘。甩去孔內(nèi)液體，如上洗滌，拍干。
5. 顯色反應(yīng)：加底物（3號液）和顯色劑（4號液）各1滴，混勻，37℃下避光顯色10分鐘。
6. 終止反應(yīng)： 加終止液（6號液）1滴，以空白對照調(diào)零，用酶標(biāo)儀于450nm波長（630nm作為參比波長）讀取OD值。
【參考值】
1. Cut-off 值 (COV)=陰性對照平均OD值×2.1 (陰性對照孔OD值＜0.08時按0.08計)。
2. 有效性判定：
空白對照孔OD值＜0.05（若大于0.05則實(shí)驗無效）；
陰性對照孔OD值≤0.10（若大于0.10則實(shí)驗無效）；
陽性對照孔OD值≥0.30（若小于0.30則實(shí)驗無效）。
【檢驗結(jié)果的解釋】
樣本OD值≥COV值時，判為禽流感病毒抗體陽性；
樣本OD值＜COV值時，判為禽流感病毒抗體陰性。
【檢驗方法的局限性】本試劑僅適用于檢測鴨血清。
【注意事項】
1. 包被板須密封防潮。從冷藏環(huán)境中取出時，應(yīng)平衡至室溫后，方可開封啟用。未使用完的板條應(yīng)即時放回有干燥劑的自封袋中，4℃密封保存。
2. 滴加試劑前應(yīng)將滴瓶輕搖、混勻，首滴棄去；滴加試劑時瓶身應(yīng)保持豎直。
3. 瓶蓋每次使用后要蓋緊，各瓶蓋之間不可混用。不同批號試劑盒的試劑組份不可混用。
4. 孵育時，推薦使用水浴箱。如無水浴箱，可取密封濕盒放入37℃溫箱內(nèi)使用。
5. 用棄的試劑盒及樣本都應(yīng)按污染物妥善處理。試劑盒內(nèi)終止液有腐蝕性，須小心使用。
